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如何挑選適合實驗的ELISA試劑盒之實驗類型
發(fā)布時間： 2023-08-22 點擊次數(shù)： 1779次ELISA是一種廣泛應(yīng)用于大分子蛋白和小分子激素定量檢測的免疫診斷技術(shù)。ELISA實驗操作雖然不算復雜，但也有許多需要注意的事項。各個環(huán)節(jié)稍有不慎，就可能對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響。
ELISA試劑盒有多種類型，不過它們都有一個共同特點，就是進行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進行捕獲。In-cellELISA和酶聯(lián)免疫斑點ELISPoT是兩種特殊的類型，In-cellELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細胞進行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測。ELISPoT有點像蛋白印跡Westexnb1ot，先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細胞，然后在膜上檢測細胞分泌的抗原形成斑點。此外，我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是38孔板進行ELISA實驗。
通常人們使用雙抗夾心法進行ELISA實驗，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間，這種方法既靈敏又有效，受到了許多研究者的青睞。不過有時候雙抗夾心法并不是ui佳選擇，例如有時候抗原特別小讓兩個大抗體難以附著，又或者抗體只有一個抗體結(jié)合位點。在上述情況下，競爭性ELISA就更為適用，這種方法是采用帶標記的純化抗原與樣本中無標記的抗原進行競爭，以結(jié)合捕獲抗體。
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